Melatoninin Mcf-7 Hücre Kültüründeki Apoptoz Aktivasyonunun ve Sitotoksisitesinin Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR), Mtt Hücre Canlılık Testi ve İmmunsitokimya Yöntemleriyle Araştırılması

Abstract

Amaç: Dünyada ve Türkiye’de en sık görülen kanser türlerinden biri olan meme kanseri, kanser nedenli ölüm oranları arasında ilk sıralarda yer almaktadır. Bu nedenle bu hastalığın tedavisine yönelik yeni araştırmalar yapılmaktadır. Bu çalışmada, güçlü bir antioksidan olan melatoninin kanserle olan ilişkisinin ve kanser hastalığının tedavisi yönündeki katkısının araştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: Çalışmamızda, melatoninin sitotoksik dozlarını ve IC50 değerini belirleyebilmek için MCF-7 hücre hattına 10 nM–100.000 nM aralığında melatonin konsantrasyonları uygulandı. Melatonin uygulamasının ardından hücre canlılığı analizi yapıldı ve melatonin için etkin dozlar belirlendi. MCF-7 hücreleri, 5 konsantrasyon (10, 100, 1000, 10.000 ve 100.000 nM) melatonin dozu ile 24 saat inkübasyon işlemine tabi tutuldu. Tüm gruplarda melatoninin sitotoksisitesi, toplam antioksidan kapasite ve toplam oksidan düzeyi, apoptotik aktivite (Bax ve p53 immünopozitifliği) ve p53 gen ekspresyon düzeyleri incelendi. Bulgular: Yirmi dört saatlik inkübasyon sonunda MCF-7 hücrelerine uygulanan melatoninin hücre proliferasyonunu inhibe ederek sitotoksik etki yaptığı (p<0.05), p53 gen ekspresyonunu ve Bax protein sentezini artırdığı tespit edildi. İmmünsitokimyasal boyamada Bax ve p53 immünpozitifliğinin arttığı belirlendi. Ayrıca melatonin tedavisi TAS’ı artırıp TOS’u azalttı. Sonuç: Bu etkiler, melatoninin p53 gen ekspresyonu ve Bax proteinindeki artışa bağlı olarak apoptoz aktivasyonunu indüklediğini ve dolayısıyla kanser tedavisinde kullanılabilecek yardımcı bir ajan olabileceğini göstermektedir.