miR1825'in Baş ve Boyun Kanserinde In Vivo Tümörigenez Potansiyelinin Nude Fare Modellerinde İncelenmesi

Abstract

Baş ve boyun skuamöz hücreli karsinom (BBSHK) genetik ve çevresel etkilerin rol aldığı karmaşık bir etiyolojiye sahiptir. Sigara ve alkol tüketimi ile insan papiloma virüsü önemli çevresel risk faktörleri olarak bilinmektedir. Ayrıca hücre bölünmesi, DNA onarımı ve apoptoz ile ilişkili genlerde ve mikroRNA?lardaki mutasyonlar ve anormal ifade değişiklikleri BBSHK?ya yol açabilecek faktörler arasındadır ve bunların birbirleriyle ilişkisi karmaşık moleküler bir arka plan oluşturmaktadır. Kanser ilişkili ölümlerin azaltılması, kanser hastalarının yaşam kalitesinin artırılması ve kanserin etkili bir şekilde tedavi edilmesi için karsinogenez sürecindeki moleküler mekanizmaların tam olarak aydınlatılması önemli ve gerekli bir adım olarak düşünülmektedir. In vivo modeller karsinogenez süreçlerinin moleküler açıdan daha iyi anlaşılması ve yeni tedavi yaklaşımlarının geliştirilebilmesi için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu modeller teknik açıdan insan tümörlerinin in vivo ortamını yansıtabilmekte ve hızlı tümör gelişimine imkân sunarak hızlı bir şekilde sonuç alınmasına imkân sağlamaktadır. Bu yönüyle, subkütan yolla oluşturulan ksenograft model, tümör oluşum potansiyelinin belirlenmesi ve meydana gelen histolojik ve moleküler değişikliklerin incelenmesi açısından ideal bir model olması dolayısıyla miR-1825?in baş ve boyun kanserlerinde onkogenik potansiyelini NUDE farelerde in vivo kanser modeli oluşturarak araştırmayı amaçladık. Başlangıçta miR-1825?in ifadesinin Hep-2 ve FaDu hücrelerinde başarılı bir şekilde stabil olarak overeksprese edildiği qRT-PCR kullanılarak doğrulandı. Ardından artmış miR-1825 ifadesinin hücre canlılığını anlamlı derecede arttırdığı CVDK-8 testi ile gösterildi. Daha sonra miR-1825?i stabil olarak yüksek düzeyde ifade eden Hep-2 ve FaDu hücreleri sübkütan yol ile NUDE farelere enjekte edildi ve bir aylık takip sonunda miR-1825?i overeksprese eden hücrelerin kontrol hücrelere göre daha büyük tümörler oluşturduğu gösterildi. Oluşan tümör dokularındaki Ki-67 hücre proliferasyon indeksindeki değişim immünohistokimyasal yöntem ile gösterildi. Ayrıca miR-1825?in overeksprese edildiği gruplarda gelişebilecek olası metastazları incelemek adına, baş ve boyun kanserlerinin yaygın uzak metastaz bölgelerinden birisi olan akciğerlerdeki metastatik lezyonların varlığı ve sayısı HE boyamaları yapılarak incelendi ama metastatik odak tespit edilemedi. Tüm bu bulgular, miR-1825?in baş ve boyun kanserlerinde onkojenik potansiyele sahip olduğunu ve tümör gelişimini teşvik ettiğini ortaya koymaktadır.