Prostat Kanseri Hücre Hatlarında miR145'in SEMA3A Promotörü Üzerindeki İndükleyici Rolünün Araştırılması

Abstract

MikroRNA'lar endojen olarak sentezlenen, yaklaşık 18-24 nükleotid uzunluğunda, tek zincirli ve kodlamayan kısa ribonükleik asitlerdir (RNA) ve kanser araştırmaları alanında son zamanların en popüler konuları arasına girmiştir. MikroRNA'ların düzensiz ifadesi, PKa de dahil çeşitli kanser türleriyle ilişkilendirilmiştir. Bu çalışmada, miR-145'in PKa hücre hatlarında SEMA3A'nın ifadesini indükleyici rolünün araştırılması amaçlanmıştır. PKa hücre hatları PC3 ve DU145 hücrelerinde normal prostat epitel hücre hattı olan PNT1a ile karşılaştırıldığında p53, miR-145 ve SEMA3A ifadesinin PKa hücrelerinde azaldığı gösterildi. MiR-145'in artan ifadesinin PKa hücrelerinde SEMA3A'nın ifadesini hem mRNA hem de protein düzeyinde artmasına sebep olduğu ortaya konuldu. Ayrıca, artmış miR-145 ifadesinin, PC3 ve DU145 hücrelerinde hücre canlılığının azalmasına yol açtığı tespit edildi. Bunun yanı sıra, artan miR-145 ifadesinin, SEMA3A promotör bölgesinde RNA Pol II zenginleşmesine yol açarak transkripsiyonel aktiviteyi artırdığı ve SEMA3A promotörü tarafından kontrol edilen lusiferaz aktivitesini indüklediği belirlendi. SEMA3A promotöründeki miR-145 olası hedef dizisinde mutasyon oluşturulduğunda ise lusiferaz aktivitesinde değişim olmadığı ortaya konuldu. Bu çalışmada elde ettiğimiz verilerle miR-145'in fonksiyonlarının gen susturulması ile sınırlı olmadığı ve transkripsiyonel düzeyde gen ifadesinde değişikliklere neden olabileceği gösterilmiştir. Bu sonuçlar ile miR-145'in PKa hücrelerindeki tümör süpresör fonksiyonlarından birisinin SEMA3A promotörünü hedefleyerek onun ifadesinin artmasına yol açmak olduğu belirlenmiş ve bu şekilde miR-145?in prostat karsinogenezindeki rolünün aydınlatılmasına katkı sağlamıştır.